基因工程载体的作用-什么是基因工程的载体?
什么是基因工程的载体
基因工程载体是能将分离或合成的基因导入细胞的DNA分子,有质粒DNA、病毒DNA、科斯质粒三种主要类型的载体。
按人们的意愿去有目的地改造,创建生物遗传性,因此其最基本的工程就是要得到目的基因或核酸序列的克隆。分离或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖,需要载体携带它们到合适的细胞中复制和表现功能。常用的载体有质粒,噬菌体和病毒等。
对理想的基因工程载体一般至少有以下几点要求:
①能在宿主细胞中复制繁殖,而且要有较高的自主复制能力。
②容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好。
③容易插入外来核酸片段,插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点。每种酶的切位点只有一个。
④容易从宿主细胞中分离纯化出来, 这才便于重组操作。
⑤有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作。
基因表达载体构建的意义
基因表达载体构建是指目的基因与运载体结合。
基因表达载体构建是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。
基因表达载体构建的意义是使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。
质粒作为基因工程载体的优点
质粒在基因工程中是一类重要的载体,其作用主要是携带一些基因片段(可以是编码基因,也可以是调控区等),在细胞内环境中进行表达或参与通路的相互作用,达成人们希望的目的,这些目的一般包括:取得蛋白产物(有直接提取的,也有表达酶进行药物合成的),探究基因相互作用关系(比如过表达某一特定基因观察表型变化)。
总之质粒的作用一句话,将一段属于或者不属于这个物种的基因片段引入细胞/个体环境中。并进行后续研究。
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基因工程中常提到t载体,什么是t载体,t载体有什么作用
t载体就是T-DNA,是一类可以重组到受体生物染色体上的载体,通常被应用于植物的基因重组过程中。
为什么基因工程载体要放两个标记基因
基因工程中最好有多个标记基因,避免有的标记基因里有限制酶 切点而导致不能使用该标记基因。作用是便于筛选的,就是检测目的基因是否进入受体细胞
基因工程中标记基因必不可少,基因工程的核心步骤,构建基因表达载体,中用标记基因检测重组质粒是否已经导入受体细胞中,从而区分己导入细胞和未导入细胞。